为30 mL 5% 碳酸钠溶液加入20 mL 1% 硫酸铜溶液中，然后加入适量的稀盐酸使溶液变为淡蓝色后，加入适量的无水甲醇使溶液变为浅绿色，最后加入2-3滴无水甲醛。这种配制方法可以用于测定纤维素的含量。因为斐林试剂由碱性碳酸钠、盐酸、铜和甲醛组成，其中铜能够在碱性环境下与糖类发生氧化还原反应，从而生成红色或棕色沉淀物，并且甲醛可以使其变成蓝色或绿色，可以用于定量测定纤维素等含糖物质的浓度。斐林试剂可广泛用于对于糖类物质的定性、定量检测，比如在食品、饮料、医药等各个领域。但是在使用斐林试剂时需要注意化学品的安全操作，如佩戴护目镜、实验室实验前应预防火源等。
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